engleski

RETARGETING ADENOVIRUS TYPE 5 TO INTEGRIN α 4β 1

Stanice akutne mijeloične leukemije (AML) na svojoj površini eksprimiraju povećanu količinu integrina α 4β 1 (VLA-4), za koji je nedavno izdvojen vezujući peptidni slijed CPLDIDFYC. Cilj ovog istraživanja je konstrukcija replikacijski defektnog vektora temeljenog na adenovirusu tip 5 (Ad5), ugradnjom vezujućeg slijeda za α 4β 1 integrin. Ad5VLA4 je konstruiran ugradnjom hibridiziranih oligonukleotida koji kodiraju CPLDIDFYC slijed u HI petlju Ad5 proteina vlakna. Ugradnja promijenjenog proteina vlakna u cjelovit Ad5 genom, prethodno ugrađenim u plazmidni vektor, učinjena je metodom kotransformacije i homologne rekombinacije dvaju plazmida u bakterijama E. coli. Ispravnost konstrukcija potvrđena je određivanjem slijeda nukleotida. Čestice Ad5VLA4 dobivene su transfekcijom u kulturu ljudskih embrionalnih stanica bubrega HEK-293. Ad5VLA4 i kontrolni Ad5wt, umnoženi su u kulturi HEK-293 stanica, te pročišćeni u gradijentu cezijeva klorida. Infekcija Ad5VLA4 će dalje biti istražena u AML stanicama koje eksprimiraju povećanu količinu integrina α 4β 1 kako bi se pokazao potencijal preusmjeravanja. Ako rezultati potvrde naša očekivanja, konstruirat ćemo Ad5 vektor koji će eksprimirati gen samoubojicu i moći će se istražiti u liječenju AML in vivo.

integrin α 4β 1; adenovirus; retargeting

Sažetak je tiskan na hrvatskom i engleskom jeziku.