engleski

THE ABILITY OF RGD4C AND NGR4C TARGETING MOTIFS TO MEDIATE DIRECT INTERNALIZATION OF RETARGETED ADENOVIRUSES

Jedan od načina preusmjeravanja adenovirusa tip 5 (Ad5) je modifikacija tropizma genskom ugradnjom preusmjeravajućeg slijeda u Ad5 vlakno. Nedavno smo pokazali da se Ad5NGR4C, koji sadrži NGR4C slijed, veže na APN na površini RD stanica. U ovom istraživanju željeli smo istražiti da li NGR4C može posredovati direktnu internalizaciju Ad5NGR4C. U radu su korišteni sljedeći adenovirusi: Ad5wt, Ad5NGR4C, Ad5RGD4C, Ad5FbΔ 639, Ad5FbΔ 639NGR4C i Ad5FbΔ 639RGD4C. Ad5FbΔ 639 ima kratko vlakno te stoga preusmjeravajući slijed ugrađen u HI petlju tog vlakna može omogućiti uspješniju transdukciju samo u slučaju kada posreduje i direktnu internalizaciju Ad5 vektora. Kao pozitivna kontrola korišten je Ad5FbΔ 639RGD4C koji u kratkom vlaknu ima ugrađen RGD4C slijed. Ad5FbΔ 639RGD4C transducira RD stanice 47 puta bolje od Ad5wt. Ad5FbΔ 639RGD4C u usporedbi sa Ad5FbΔ 639 transducira RD stanice 27 puta bolje što ukazuje da RGD4C zaista posreduje direktnu internalizaciju Ad5. Ad5NGR4C i Ad5FbΔ 639NGR4C vežu se bolje od Ad5wt i Ad5FbΔ 639 na površinu RD stanica i to 2, 8 odnosno 6, 6 puta. Ad5NGR4C transducira RD stanice 2, 4 puta bolje od Ad5wt, međutim uspješnost transdukcije Ad5FbΔ 639NGR4C i Ad5FbΔ 639 je podjednaka. Na osnovu dobivenih rezultata može se zaključiti da NGR4C ugrađen u HI petlju kratkog vlakna, unatoč povećanom vezanju za APN, ne omogućava direktnu internalizaciju Ad5 vektora.

RGD4C; NGR4C; direct internalisation

Sažetak je tiskan na hrvatskom i engleskom jeziku