hrvatski

Giberelin 20-oksidaza iz kukurijeka (Helleborus niger L.): od bioinformatičke analize do detekcije enzima u biljnom tkivu

Lapovi kukurijeka (Helleborus niger L.), koji su bijele ili ružičaste boje za vrijeme cvjetanja, preživljavaju i intenzivno ozelenjavaju za vrijeme razvoja i sazrijevanja plodova. Ovakav se obrazac razvoja razlikuje od onog kod uobičajenih biljnih modela. Proces ozelenjavanja zakočen je u neoplođenim cvjetovima i cvjetovima kojima su uklonjeni tučci, no može se potaknuti dodatkom egzogenih giberelina. Nadalje, analize endogenih hormona dokazale su prisustvo aktivnih giberelina GA1 i GA4 u cvijetu kukurijeka nakon oplodnje iz čega se može zaključiti da giberelini imaju važnu ulogu u preobrazbi lapova. Protein giberelin 20-oksidaza (GA20ox) ključni je enzim u biosintezi aktivnih giberelina. U ovom radu, djelomična cDNA koja kodira GA20ox klonirana je te je proizveden rekombinantni protein u bakterijskom sustavu. Inkluzijska tijela, koja su sadržavala GA20ox, istaložena su i razdvojena elektroforezom u denaturirajućim uvjetima. Proteinska pruga koja je odgovarala GA20ox izrezana je iz gela i korištena za servisnu proizvodnju poliklonskih protutijela imuniziranjem zeca. Dobivena protutijela korištena su za Western analizu te je potvrđena prisutnost GA20ox u biljnom tkivu. Provedena je bioinformatička analiza proizvedenog proteina GA20ox uz pomoć računalnih programa (http://www.expasy.ch/).

giberelin 20-oksidaza; kukurijek; Helleborus niger L.

nije evidentirano