hrvatski

Povećana ekspresija transgena unesenog adenovirusom tip 5 u stanicama karcinoma grkljana čovjeka otpornima na cisplatinu

Većina istraživanja u genskoj terapiji tumora kao vektore koristi adenoviruse tipa 5 (Ad5). U literaturi je više puta pokazana povećana djelotvornost Ad5 transdukcije i/ili povećana djelotvornost ekspresije transgena unesenog s Ad5 u stanicama otpornima na citostatike u odnosu na roditeljske stanice. Stoga bi Ad5 posredovana genska terapija mogla biti uĉinkovitija u lijeĉenju tumora koji su razvili otpornost kao odgovor na primijenjenu kemoterapiju nego u lijeĉenju primarnog tumora. Ovim je radom pokazano kako stanice karcinoma grkljana ĉovjeka otporne na cisplatinu CK2 pokazuju povećanu ekspresiju transgena β-galaktozidaze unesenog replikacijski defektnim Ad5 u odnosu na roditeljske HEp2 stanice. Metodom protoĉne citometrije utvrĊena je promijenjena ekspresija coxsackie-adenovirusnog receptora (CAR), integrina αvβ5 i α3β1 te podjedinica integrina αv, β1 i α5 u odnosu na roditeljske HEp2 stanice. Semikvantitativnom reakcijom PCR utvrĊeno je povećano vezanje i jednaka internalizacija Ad5RSVβgal u CK2 stanicama u odnosu na HEp2 stanice. Diferencijalnom analizom preusmjerenim adenovirusima pokazano je kako niti jedna od molekula koje su povećano ili smanjeno eksprimirane na površini CK2 stanica nije kljuĉna za i fenomen povećane ekspresije transgena unesenog adenovirusom. Prema dobivenim rezultatima zakljuĉujemo kako je uzrok povećane ekspresije Ad5-unesenog transgena u CK2 stanicama u usporedbi s HEp2 stanicama vrlo vjerojatno razliĉito putovanje adenovirusnih ĉestica u stanici do mjesta ekspresije transgena. si-RNA posredovanim utišavanjem integrina α3β1 utvrĊeno je kako povećana ekspresija ovog integrina nije odgovorna za pojavu otpornosti kod CK2 stanica. Dobiveni rezultati potvrĊuju pretpostavku kako bi Ad5 posredovana genska terapija mogla biti uspješan pristup u lijeĉenju tumorskih stanica otpornih na kemoterapiju.

cisplatina; otpornost; genska terapija tumora; adenovirus; transdukcija; ekspresija transgena

nije evidentirano