Konstrukcija kromosomskog, točkastog mutanta bakterije Echerichia coli u C-terminalnom dijelu gena recC i njegova karakterizacija (CROSBI ID 371529)
Ocjenski rad | diplomski rad
Podaci o odgovornosti
Antolović, Vlatka
Brčić-Kostić, Krunoslav ; Zgaga, Zoran
Vlašić, Ignacija
hrvatski
Konstrukcija kromosomskog, točkastog mutanta bakterije Echerichia coli u C-terminalnom dijelu gena recC i njegova karakterizacija
Enzim RecBCD je glavni enzim inicijacije homologne rekombinacije u bakteriji E. coli. U svrhu određivanja uloge dijela RecC podjedinice u ukupnoj aktivnosti enzimskog kompleksa RecBCD konstruirala sam mutant u kojem je arginin na poziciji 839 proteina RecC zamjenjen glicinom. Za tu aminokiselinu pretpostavljeno je da se nalazi u direktnoj interakciji s jednolančanom DNA prilikom formiranja inicijalnog RecBCD-DNA kompleksa. Za prijenos točkaste mutacije s prethodno konstruiranog plazmida na kromosom bakterije E. coli koristila sam vektor za zamjenu gena pKOV. Nakon što sam potvrdila unešenu mutaciju, novokonstruirani soj IV391 karakterizirala sam određivanjem rekombinacijske sposobnosti, efikasnosti popravka lomova u DNA i nukleazne aktivnosti. Soj IV391 pokazao je rekombinacijsku proficijentnost, efikasan popravka DNA i nukleaznu aktivnost, što znači da uvedena mutacija nije rezultirala promjenom fenotipa. Međutim, metoda zamjene gena pomoću vektora pKOV pokazala se uspješnom, te se može i ubuduće koristiti za unošenje ciljanih, točkastih mutacija u kromosom bakterije E. coli.
Echerichia coli; enzim RecBCD; homologna rekombinacija; zamjena gena
nije evidentirano
engleski
The construction of chromosomal point mutant strain of Escherichia coli in C-terminal domain of recC gene and its characterization
nije evidentirano
Echerichia coli; gene replacement; homogous recombination; RecBCD enzyme
nije evidentirano
Podaci o izdanju
40
20.12.2007.
obranjeno
Podaci o ustanovi koja je dodijelila akademski stupanj
Prehrambeno-biotehnološki fakultet
Zagreb
